双核心期刊中国组织工程研究2015年

《中国组织工程研究》Vol.19,No41干细胞培养与移植?中文核心期刊要目总览收录?中国科技论文统计源期刊骨髓干细胞骨关节炎患者膝关节滑膜组织来源间充质干细胞的增殖与分化目的：观察骨关节炎患者膝关节滑膜组织来源间充质干细胞的增殖和定向分化能力。方法：对滑膜组织来源间充质干细胞进行分离及培养，采用MTT法检测细胞增殖能力，于成骨诱导第7天定量检测碱性磷酸酶活性，诱导第7，14，21天检测成骨相关基因表达，诱导第21天行茜素红染色。骨髓间充质干细胞SCA-1+/CD45+/CD31+亚群的归巢能力目的：探讨小鼠骨髓间充质干细胞各亚群在心肌修复中的归巢能力。方法：以小鼠心肌干细胞表面分化抗原筛查小鼠骨髓间充质干细胞，再以CD45、CD31为标准分选得到小鼠骨髓间充质干细胞4个亚群。采用Transwell小室检测各亚群组细胞的归巢能力。将各亚群细胞注入心肌梗死48h小鼠体内，注射后48，96h及7d处死小鼠取其心脏完成小动物活体成像并检测其荧光强度。激素性股骨头坏死模型大鼠骨髓间充质干细胞增殖及定向诱导能力均降低目的：评价激素性股骨头坏死模型大鼠骨髓间充质干细胞的增殖能力以及定向诱导分化能力。方法：20只SD大鼠随机分为对照组和观察组，每组10只，观察组构建激素性股骨头坏死模型，分离培养两组大鼠骨髓间充质干细胞。采用CCK-8法检测第3代骨髓间充质干细胞增殖情况。选择第3代骨髓间充质干细胞进行成骨、成脂定向诱导分化。成骨诱导7，14d行碱性磷酸酶染色和茜素红染色，成脂诱导21d行油红O染色。氯化锂对去卵巢骨质疏松大鼠骨微结构和骨髓基质细胞分化的影响目的：探讨氯化锂对去卵巢骨质疏松大鼠骨微结构和骨髓基质细胞分化的影响。方法：将30只3月龄雌性健康未孕SD大鼠去卵巢，因2只大鼠由于感染死亡，将剩下28只大鼠随机分为去卵巢体内组(9只)、去卵巢体外组(10只)和氯化锂组(9只)。手术后第11周，氯化锂组按照体质量每周腹腔注射3次氯化锂，剂量为15mg/kg，干预8周后，用micro-CT检测9只去卵巢体内组和9只氯化锂组大鼠左侧股骨的骨微结构。10只去卵巢体外组大鼠的双侧股骨和胫骨用于骨髓基质细胞的培养，接种24h后加入氯化锂，分为0mmol/L(对照组)、1mmol/L组和5mmol/L组，培养至第6天和第8天更换培养基并加入相应浓度氯化锂，培养第10天处理细胞，用Westernblot检测其SP7、Runx2和PPARγ2蛋白的表达水平。PTEN基因沉默对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响目的：探讨PTEN基因沉默对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响，以期为组织工程提供更优良的种子细胞。方法：采用脂质体法转染PTEN基因特异的siRNA沉默PTEN基因，RT-PCR检测PTEN基因的表达，通过细胞生长曲线、细胞周期、Transwell实验观察PTEN基因修饰后细胞生物学特性的变化。脂肪干细胞血小板衍生内皮细胞生长因子转染脂肪间充质干细胞促进移植脂肪血管化目的：探索血小板衍生内皮细胞生长因子和脂肪间充质干细胞的双重促进脂肪移植成活率的作用。方法：①从新西兰大白兔腹股沟皮下脂肪中获取脂肪间充质干细胞，将第3代脂肪间充质干细胞分为实验组、对照组和空白组。实验组以Lenti-PD-ECGF-EGFP转染脂肪间充质干细胞，对照组以Lenti-EGFP转染脂肪间充质干细胞，空白组脂肪间充质干细胞未转染任何病毒。②取已被Lenti-PD-ECGF转染的脂肪间充质干细胞与DMEM完全培养基混合，然后与脂肪组织混合，作为A组；同样的方法用未转染任何病毒液的脂肪间充质干细胞制备B组，单独应用DMEM完全培养基而没有任何细胞成分的为C组。3组移植物注射于大白兔背部左上(A组)、左下(B组)、右上(C组)部皮下组织中。miR-对脂肪间充质干细胞向成脂和成骨分化的调控目的：探究miR-b对脂肪间充质干细胞向成脂和成骨分化的调控作用。方法：miR-模拟物转染作用于脂肪间充质干细胞进行成骨成脂诱导，对照组转染miR-阴性对照模拟物miR-NC。采用碱性磷酸酶染色及活性分析、茜素红染色、油红O染色和萃取实验观察miR-上调对脂肪间充质干细胞成骨和成脂分化的影响，以及Westernblot检测miR-上调后成骨分化转录因子Runx2和成骨早期标志物碱性磷酸酶在脂肪间充质干细胞中的表达。人髌下脂肪垫来源脂肪间充质干细胞的分离、培养及鉴定目的：探讨自髌下脂肪垫中分离、培养脂肪间充质干细胞的策略及细胞分子表面标记情况。方法：髌下脂肪垫组织取自膝关节镜手术的患者，以Ⅰ型胶原酶消化消化脂肪组织获取干细胞，用10%低糖DMEM培养基培养，利用MTT法测定不同代细胞增殖情况并绘制生长曲线。检测第5代细胞表面CD29及CD44的表达。肿瘤干细胞胃癌干细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性目的：体外环境下分析胃癌干细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性，了解胃癌化疗耐药相关机制。方法：基于克隆形态的分选策略，从人胃癌AGS细胞系内分离胃癌干细胞克隆，采用免疫细胞化学染色分析不同克隆CD44和胸苷酸合成酶的表达，克隆形成实验评估不同类型克隆的自我更新能力，CCK-8法检测不同浓度5-氟尿嘧啶作用下人胃癌AGS细胞克隆生长抑制率。顺铂在大鼠体内富集胃癌干细胞目的：观察顺铂在大鼠体内富集胃癌干细胞的情况，研究其表面标志蛋白的筛选方法。方法：建立BGC-胃癌模型大鼠，采用随机对照方法将大鼠分为2组，实验组大鼠分别尾静脉注射质量浓度0.1，0.2，0.25，0.3g/L的顺铂，而对照组则尾静脉注射生理盐水。经过3期化疗，最后得到富集胃癌干细胞组织；采用高通量蛋白芯片对肿瘤表面蛋白进行提取，并采用Westernblot对芯片进行验证，比较顺铂在大鼠体内富集胃癌干细胞及其表面标志蛋白的筛选方法。CD+卵巢癌干细胞样细胞在血管内皮细胞中的分化目的：探讨CD+卵巢癌干细胞样细胞向血管内皮细胞分化的特点。方法：通过无血清培养方法从卵巢癌A细胞株中成功诱导出CD+卵巢癌干细胞样细胞，在体外接种于铺或不铺Matrigel基质胶的96孔板内，观察不同时间点CD+卵巢癌干细胞样细胞和人脐静脉内皮细胞形成管腔样结构能力。通过裸鼠皮下移植实验，免疫荧光法观察CD+卵巢癌干细胞样细胞在卵巢癌血管新生中的作用。miR-对胶质瘤干细胞的抑制作用目的：探索miR-对CD+细胞的作用。方法：利用流式细胞分选将U87胶质瘤细胞中分为CD+和CD-细胞。通过脂质体转染构建miR-过表达的胶质瘤干细胞。miR-对胶质瘤干细胞的抑制作用目的：探索miR-对CD+细胞的作用。方法：利用流式细胞分选将U87胶质瘤细胞中分为CD+和CD-细胞。通过脂质体转染构建miR-过表达的胶质瘤干细胞。脐带脐血干细胞胎儿脐血间充质干细胞治疗大鼠急性心肌梗死目的：探讨胎儿脐血间充质干细胞移植治疗大鼠心肌梗死的效果。方法：选取32只大鼠结扎左冠状动脉前降支制作心肌梗死动物模型，随机等分为移植组和梗死组，从胎儿脐血中分离培养脐血间充质干细胞，制备脐血间充质干细胞悬液，对移植组大鼠进行脐血间充质干细胞移植。人脐带间充质干细胞对异位子宫内膜细胞增殖及凋亡的影响目的：探讨人脐带间充质干细胞对异位子宫内膜细胞增殖及凋亡的影响。方法：分离培养人脐带间充质干细胞和异位子宫内膜细胞，以异位子宫内膜细胞单独培养作为对照组，人脐带间充质干细胞与异位子宫内膜细胞共培养作为观察组。培养24，48，72h时采用MTT法检测异位子宫内膜细胞增殖情况，流式细胞仪检测异位子宫内膜细胞凋亡情况，RT-PCR检测异位子宫内膜细胞PTEN基因表达情况。干细胞移植脐带源间充质干细胞移植治疗肝纤维化及肝硬化的相关机制目的：研究人脐带源间充质干细胞移植对大鼠肝纤维化及肝硬化的治疗作用及其作用机制。方法：应用CCl4诱导制备肝纤维化及肝硬化模型，造模后经尾静脉注射人脐带间充质干细胞。细胞移植后采用BeckmanCoulteranalyzer检测人脐带源间充质干细胞移植对大鼠肝功能的影响；采用天狼猩红染色检测肝组织病理改变；应用免疫组织化学染色、Westernblot和real-timeQ-PCR方法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶抑制剂2蛋白与mRNA在大鼠肝组织中的表达。复合骨髓间充质干细胞的生物型异种韧带移植修复损伤前交叉韧带目的：探索生物型异种韧带替代同种异体韧带移植重建山羊前交叉韧带损伤的可行性。方法：将24只健康山羊随机等分成A，B，C三组，取羊的左膝关节，制作成前交叉韧带断裂缺失模型，建立胫骨、股骨端骨隧道后，A，B，C组分别植入复合骨髓间充质干细胞的生物型异种韧带、生物型异种韧带和同种异体韧带。CT灌注成像评价神经干细胞移植脑梗死模型大鼠的神经功能恢复目的：应用CT灌注技术评价神经干细胞移植脑梗死大鼠的神经功能恢复情况。方法：60只SD大鼠中随机分为对照组、脑梗死组、移植组，每组20只，后两组制备大脑中动脉梗死模型，建模后24h，脑梗死组通过尾静脉注射PBS，移植组注射8×个神经干细胞。分别于细胞移植后的1，3，7，14，28d行CT灌注成像，移植后1，2，3，4周采用mNSS进行神经功能评分，移植后4周TTC染色计算各组的脑梗死体积，移植后2周苏木精-伊红染色观察脑组织病理变化。丙泊酚联合骨髓间充质干细胞移植对脊髓损伤大鼠后肢功能及电生理的影响目的：探讨骨髓间充质干细胞移植联合丙泊酚对脊髓损伤大鼠后肢功能和电生理的影响。方法：80只成年的Wistar大鼠，建立脊髓损伤模型，按照随机数字表法分为4组(n=20)：骨髓间充质干细胞组、对照组、联合组、丙泊酚组。建模后6h通过1mL注射器经尾静脉注入骨髓间充质干细胞悬液、细胞培养液、骨髓间充质干细胞悬液+丙泊酚注射液、丙泊酚注射液。分别于造模前、造模后1，3d与1-4周通过BBB评分、改良Tarlov评分、斜板试验进行运动功能评定。造模后4周取材用荧光显微镜观测PKH-26标记的骨髓间充质干细胞存活及分布情况，病理切片进行苏木精-伊红染色。第4周进行辣根过氧化物酶示踪分析神经纤维的再生情况，运动诱发电位和体感诱发电位分析大鼠神经电生理恢复情况。自体骨髓干细胞移植治疗动脉硬化闭塞症：7年结局评价目的：观察自体骨髓干细胞移植治疗下肢动脉硬化闭塞症的长期临床疗效。方法：自年9月至年7月接受自体骨髓干细胞移植治疗的39例动脉硬化闭塞症患者，共行自体骨髓干细胞移植56次。随访截止时间为年2月，随访时间共7年6个月余，治疗后每年定期电话随访患肢疼痛、冷感、间歇性跛行距离、静息状态下踝肱指数和患肢溃疡的面积和深度，治疗后1年复查患肢动脉造影和静脉血气分析。骨髓间充质干细胞在微损伤环境中修复骨不连目的：探讨骨髓间充质干细胞在微损伤环境中对骨不连的治疗效果。方法：选取清洁级纯种新西兰大白兔40只，采用随机数字表法分为实验组与对照组，每组20只。按照手术操作流程获取胫骨骨髓，分离培养骨髓间充质干细胞，待细胞增殖到第3代够数量级时，进行超顺磁氧化铁纳米粒子培养标记。在兔前肢桡骨中段约15mm处造成骨缺损，骨缺损6周发生骨不连。实验组大白兔将骨髓间充质干细胞与髂骨碎粒一起植入骨缺损处。对照组不进行干细胞移植，于骨缺损处植入髂骨碎粒。术后12周内，观察大白兔骨不连部位大体形态、X射线片、病理学染色结果。人端粒酶反转录酶基因修饰骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死目的：观察hTERT基因转染骨髓间充质干细胞移植对脑梗死大鼠神经功能恢复的影响。方法：建立大鼠大脑中动脉阻塞模型，随机分为脑梗死组、骨髓间充质干细胞移植组和hTERT转染骨髓间充质干细胞移植组，每组20只，分别于尾静脉注射1mLPBS，1mL第9代骨髓间充质干细胞悬液(细胞浓度2.5×L-1)和第9代hTERT基因转染骨髓间充质干细胞悬液(细胞浓度2.5×L-1)。于移植前及移植后对各组大鼠进行改良神经功能学评分，应用RT-PCR、WesternBlot检测梗死脑组织中hTERT基因及蛋白表达的变化，TUNEL法测定脑组织中细胞凋亡情况。免疫耐受新方法单倍型造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血目的：探索免疫耐受新方法单倍型异基因造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血的模式，解决移植后排斥和移植物抗宿主病问题。方法：医院血液科在年4月至年5月期间采用单倍型供者造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血患者12例，单倍型供者采集经动员的骨髓及外周血干细胞，预处理方案中给予环磷酰胺mg/m2，连续用3d，移植后+3d用环磷酰胺诱导免疫耐受，剂量为50mg/kg。干细胞培养与分化雷帕霉素联合CD34抗体复合支架快速捕获外周血中内皮祖细胞目的：观察雷帕霉素联合CD34抗体复合支架捕获内皮祖细胞能力及其所捕获内皮祖细胞的分化特征。方法：通过扫描电镜及间接免疫荧光观察雷帕霉素联合CD34抗体复合支架体外捕获外周血内皮祖细胞形态及其分化特征。通过荧光显微镜观察雷帕霉素联合CD34抗体复合支架植入兔耳动脉后捕获内皮祖细胞情况及支架片段的内皮化程度。低浓度β-甘油磷酸钠培养牙髓干细胞向成牙本质细胞分化及相关因子的表达目的：观察在低浓度β-甘油磷酸钠条件培养下，牙髓干细胞向成牙本质细胞分化过程中，牙本质基质蛋白1、牙本质涎蛋白和细胞外基质磷酸糖蛋白的表达情况。方法：分离培养人牙髓干细胞，用不同浓度的诱导液诱导牙髓干细胞分别向脂肪细胞，成骨细胞分化，证实其多向分化能力。用5mmol/Lβ-甘油磷酸钠诱导培养牙髓干细胞向牙本质细胞分化，分别在培养第7，14，21，28天提取各组细胞RNA，反转录PCR检测牙本质基质蛋白1、牙本质涎蛋白和细胞外基质磷酸糖蛋白的表达情况；诱导牙髓干细胞向成牙本质细胞分化形成的矿化结节用AlizarinRedS法检测。干细胞基础实验大鼠神经母细胞特异性转移因子基因重组腺病毒载体的构建及鉴定目的：构建携带鼠ASCL1基因的重组腺病毒表达载体，获得重组腺病毒pAd-rat-ASCL1-EGFP，以期为进一步研究ASCL1基因的功能奠定基础。方法：用XhoⅠ和EcoRⅠ将目的基因ASCL1及带有增强型绿色荧光蛋白表达盒的腺病毒穿梭载体pYr-adshuttle-4进行双酶切；回收酶切质粒的目的片段进行连接，产物转化至DH5α感受态；提取质粒酶切鉴定正确后测序。然后通过LR体外同源重组将rat-ASCL1表达框构建至pAd/PL-DEST腺病毒表达载体，PacⅠ酶切线性化后用脂质体法转染HEK细胞进行包装、扩增，采用PCR法对重组腺病毒进行鉴定，TCID50法测定病毒滴度，荧光显微镜观察病毒感染效率。综述与专讨间充质干细胞源性微囊泡和诱导性多潜能干细胞促进关节软骨修复的进展目的：综述间充质干细胞源性微囊泡和诱导性多潜能干细胞促进软骨修复的研究进展。方法：由第一作者应用计算机检索PubMed、中国期刊全文数据库(CNKI)年至年8月相关文献，英文检索词为“Articularcartilageinjury，Bonemarrowmesenchymalstemcells”，中文检索词为“软骨损伤，骨髓间充质干细胞”。选择文章内容与干细胞治疗骨关节炎有关者，同一领域文献则选择近期发表在权威杂志文章。无血清培养人胚胎干细胞的体系研究与进展目的：综述近几年报道的人胚胎干细胞的无血清培养体系研究进展，重点是在发展适于治疗用途的无血清和无异源培养体系进程中，面临的挑战和进步。方法：应用计算机检索CNKI和PubMed学术数据库中至年关于人胚胎干细胞无血清培养的文章，排除观点重复和陈旧的文章，最后对58篇文章进行归纳汇总。不同来源干细胞治疗糖尿病性足病的原理与效果比较目的：总结近年来国内外应用不同来源干细胞治疗糖尿病的原理及治疗效果比较。方法：文章由第一作者和第二作者于年4至6月期间检索PubMed、Sciencedirect、Medline数据库年1月至年1月的相关文章。限定文章语言种类为English，检索词为“diabeticfoot，pathogenesis，stemcelltherapy”，初检文章篇，筛选后对44篇文章进行分类总结。







































刘云涛
杭州白癜风专科医院