iMEX外泌体临床分析神器

本文来自：xosoms

如今外泌体分析用于临床诊断和治疗监控显然是一个重要领域。特定的跨膜蛋白信号可以识别肿瘤特异性的外泌体，而外泌体内蛋白的改变可以用于推断肿瘤细胞对治疗措施的反应。虽然外泌体有如此大的临床价值，但是临床日常外泌体分析却十分困难，这是因为目前缺少足够灵敏且快速的试验平台，尤其是进行外泌体蛋白质分析。传统流式细胞仪无法测量不到nm的外泌体；基于微粒追踪原理或动态光散射的新型计数方法仅能提供有限的分子信息；而传统的分子试验（如WB、ELISA）需要样本量大，无法适应临床上的持续分析、病人数量庞大以及有限的生物储备量等苛刻要求。

目前临床检测外泌体方法的主要缺点

1.需要分别进行外泌体的分离与分析，无法达到一体化;

2.技术复杂，包括设备制造与操作;

3.依然需要联合使用其他分析设备（比如NMR探测仪、光谱显微镜）

面对这样尴尬的局面，iMEX闪亮登场了。IMEX将两个正交的磁性选择系统和电化学检测系统结合。使用小磁珠捕获外泌体，捕获的外泌体通过电化学传感器检测。Imx的优点：1.细胞特异性的外泌体可以不进行过滤和离心分离而直接从血浆中分离；2.通过磁性富集与酶联放大达到高敏感性；3.通过电流探测的机制，传感器可以迷你化再并联进行测量。

简单的来说就是：又快又准又EASY！

我们来介绍一下iMEX的工作原理

第一步、用表面带有抗体小磁珠捕获外泌体。

第二步、将带有HPR（氧化酶）的二抗作用于外泌体

第三步、与TMB（3,3’,5,5’-ttramthylbnzidin）混合产生电流

使用磁珠显著简化了试验程序捕获的外泌体可通过磁力收集并提升试验的敏感度，不能被结合的过量抗体、酶可被洗去。

接着研究人员利用卵巢癌患者的血浆样本做了一系列实验，来展示iMEX的能力。

首先细胞源性的外泌体与来源细胞膜成分具有相似性，也就是说外泌体膜上会带有其来源细胞膜上相同的生物标志物。

在3个卵巢癌细胞系中分别以CD63,CD9，CD81作为标志利用小磁珠分离外泌体，发现使用CD63时获得的信号明显高于CD9与CD81。

左图是利用传统流式细胞仪对四种癌细胞系和一个正常细胞系表面的六种可能的癌标志物进行检测的结果。右图是利用CD63抗体在iMEX中检测的结果。两个结果的相似性证明CD63可以作为卵巢癌外泌体的标志物。

该图比较了ELISA与iMEX对不同癌症标志物的检测结果，其相关系数R^2=0.。说明iMEX的结果可以替代ELISA。

这个结果很直观的显示出了iMEX的高敏感性。ELISA的检测限值为3*10^7，iMEX则可以达到3*10^4，敏感度是ELISA的倍。

iMEX可对药物治疗反应进行纵向监测

使用iMEX对四位病人血浆样本进行检测。对于反应阳性的患者，EpCAM、CD24的水平明显下降。对于反应阴性的患者EpCAM的水平保持稳定，CD24的水平明显升高。

参考文献

IntgratdMagnto-ElctrochmicalSnsorforExosomAnalysis.

用于外泌体分析的集成磁电化学感受器

IF=12.

作者：JongS1,ParkJ1,PathaniaD1,CastroCM1,2,WissldrR1,2,3,LH1.

出处：ACSNano.Jan28.[Epubahadofprint]

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